Yek ji avantajên sereke yên çanda şaneyê şiyana manîpulekirina kîmya fizîkî ya hilberîna şaneyê (ango germahî, pH, zexta osmotîk, tansiyona O2 û CO2) û hawîrdora fîzyolojîk e (ango hûrbûna hormon û xurekê).Ji bilî germê, hawîrdora çandê ji hêla navgîniya mezinbûnê ve tê kontrol kirin.
Her çend hawîrdora fîzyolojîk a çandê bi qasî hawîrdora wê ya laşî û kîmyewî ne zelal e, lê têgihîştina çêtirîn pêkhateyên serumê, nasîna faktorên mezinbûnê yên ku ji bo belavbûnê hewce ne, û têgihîştina çêtir a mîkro hawîrdora hucreyên di çandê de.(Yanî têkiliya xaneyê-hucreyê, belavbûna gazê, pêwendiya bi matrixê re) naha dihêle ku hin xetên hucreyê di navgînên bêserûm de werin çandin.
1.Jingeha çandê bandorê li mezinbûna şaneyan dike
Ji kerema xwe ji bîr mekin ku şert û mercên çanda hucreyê ji bo her celebê şaneyê cûda ne.
Encamên dûrketina ji şert û mercên çandê yên ku ji bo celebek hucreyek taybetî hewce ne, ji vegotina fenotîpên nenormal heya têkçûna tevahî çanda hucreyê diguhere.Ji ber vê yekê, em pêşniyar dikin ku hûn bi rêza hucreya ku hûn jê re eleqedar in nas bikin û bi hişkî rêwerzên ku ji bo her hilberek ku hûn di ceribandina xwe de bikar tînin têne peyda kirin bişopînin.
2.Tedbîrên ji bo afirandina jîngehek çanda hucreya xweşbîn a ji bo hucreyên we:
Medya çandî û serum (ji bo bêtir agahdarî li jêr binêre)
Asta pH û CO2 (ji bo bêtir agahdarî li jêr binêre)
Plastîk çandin (ji bo bêtir agahdarî li jêr binêre)
Germahiya (ji bo bêtir agahdarî li jêr binêre)
2.1 Medya Çandî û Serum
Navbera çandê beşa herî girîng a hawîrdora çandê ye, ji ber ku ew xurek, faktorên mezinbûnê û hormonên ku ji bo mezinbûna şaneyê hewce ne peyda dike, û pH û zexta osmotîk a çandê bi rê ve dibe.
Her çend ceribandinên destpêkê yên çanda hucreyê bi karanîna medyaya xwezayî ya ku ji derhênerên tevnvîs û şilavên laş hatî wergirtin hatine kirin jî, hewcedariya standardîzekirinê, kalîteya medyayê û zêdebûna daxwazê rê li ber pêşkeftina medyaya diyarker vekir.Sê celebên bingehîn ên medyayê medyaya bingehîn, medyaya serumê ya kêmkirî û medyaya bê serum in, û ji bo lêzêdekirina serumê hewceyên cûda yên wan hene.
2.1.1 Navînî bingehîn
Navgîna çanda şaneya Gibco
Piraniya xêzên hucreyê di navgînên bingehîn ên ku asîdên amînî, vîtamîn, xwêyên înorganîk, û çavkaniyên karbonê hene (wekî glukozê) baş mezin dibin, lê divê ev formûlasyonên medyaya bingehîn bi serumê werin zêdekirin.
2.1.2 Serum navîn kêm kirin
Bottle bi Gibco Low Serum Navîn
Stratejiyek din a ji bo kêmkirina bandorên neyînî yên serumê di ceribandinên çanda hucreyê de ev e ku meriv medyaya kêmkirî ya serum bikar bîne.Naveroka serumê ya kêmbûyî formula navînek bingehîn e ku ji hêla xurdemenî û faktorên ji heywanan ve dewlemend e, ku dikare mîqdara serumê ya hewce kêm bike.
2.1.3 Navgîna bê serum
Şûşeyek bi navgîniya bê serum Gibco
Navgîna bê serum (SFM) karanîna seruma heywanan bi cîh kirina serumê bi xwarin û formûlasyonên hormonê yên guncav vedigire.Gelek çandên seretayî û xêzên hucreyê xwedan formûlasyonên navîn ên bê serum in, di nav de xeta hilberîna proteîna rekombînant a Hemstera Çînî (CHO), hêlên hucreyên hîbrîdoma yên cihêreng, xetên kêzik Sf9 û Sf21 (Spodoptera frugiperda), û hem jî ji bo mêvandarê hilberîna vîrusê. (mînak, 293, VERO, MDCK, MDBK), hwd. Yek ji avantajên sereke yên karanîna navgînek bêserûm ew e ku meriv navgînê ji bo celebên şaneyên taybetî bijartî bi hilbijartina hevokek guncaw a faktorên mezinbûnê ve bijartî ye.Tabloya jêrîn awantaj û dezawantajên medyaya bê serum destnîşan dike.
Berjewendî
Zelalbûnê zêde bikin
Performansa bêtir hevgirtî
Paqijkirina hêsantir û pêvajoya jêrîn
Bi rastî fonksiyona hucreyê binirxînin
Berhemdariyê zêde bikin
Kontrolkirina çêtir reaksiyonên fîzyolojîk
Tespîtkirina medyaya hucreyê ya pêşkeftî
Lidijî
Pêdiviyên formula navîn ya taybetî ya celebê hucreyê
Paqijiya reagentê ya bilindtir hewce dike
Di mezinbûnê de hêdîbûn
2.2.1 asta pH
Piraniya xêzên xaneyên memikan ên normal di pH 7.4 de baş mezin dibin, û cûdahiyên di navbera xêzên hucreyên cihêreng de hindik in.Lêbelê, hin xêzên şaneyên veguherîdî hatine destnîşan kirin ku di hawîrdorek piçek asîd de (pH 7.0 - 7.4) çêtir mezin dibin, di heman demê de hin xetên hucreyên fîbroblast ên normal jîngehek hinekî alkalîn tercîh dikin (pH 7.4 - 7.7).Rêzên hucreyên kêzikan ên wekî Sf9 û Sf21 di pH 6.2 de çêtirîn mezin dibin.
2.2.2 asta CO2
Navgîna mezinbûnê pH-ya çandê kontrol dike û hucreyên di çandê de tampon dike da ku li hember guhertinên pH-ê bisekinin.Bi gelemperî, ev tampon bi vegirtina tamponên organîk (mînak, HEPES) an CO2-bikarbonat-ê tê bidestxistin.Ji ber ku pHya navgînê bi hevsengiya nazik a karbondîoksîtê (CO2) û bîkarbonat (HCO3-) ve girêdayî ye, guhertinên di CO2 ya atmosferê de dê pHya navgînê biguhezîne.Ji ber vê yekê, dema ku navgînek ku bi tamponek CO2-bikarbonat-based ve hatî bikar anîn, pêdivî ye ku CO2-ya biyanî bikar bînin, nemaze dema ku hucreyên di sêlên çandî yên vekirî de têne çandin an jî xêzên şaneyên veguherîdî di tansiyonên bilind de têne çandin.Her çend pir lêkolîner bi gelemperî 5-7% CO2 di hewayê de bikar tînin, piraniya ceribandinên çanda hucreyê bi gelemperî 4-10% CO2 bikar tînin.Lêbelê, her navgînek xwedan tansiyonek CO2 û bîkarbonatek pêşniyarkirî ye ku bigihîje pH-ya rast û zexta osmotîk;ji bo bêtir agahdarî, ji kerema xwe li rêwerzên hilberînerê navîn binihêrin.
2.3 Çandiniya plastîk
Plastîkên çanda hucreyê di cûrbecûr form, mezinahî û rûberan de peyda dibin ku li gorî sepanên cihêreng ên çanda hucreyê bin.Rêbernameya rûbera plastîk a çanda hucreyê û rêberê konteynera çanda hucreyê ya li jêr bikar bînin da ku ji we re bibin alîkar ku hûn ji bo serîlêdana çanda hucreya xwe plastika rast hilbijêrin.
Hemî plastîkên çanda şaneya Thermo Scientific Nunc bibînin (girêdana reklamê)
2.4 Germahiya
Germahiya optîmal a ji bo çanda şaneyê, bi rêjeyek mezin bi germahiya laşê mêvandarê ku şaneyên jê veqetandî ne ve girêdayî ye, û ta radeyek hindiktir jî bi guherînên anatomîkî yên germahiyê ve girêdayî ye (mînak, germahiya çerm dibe ku ji ya masûlkeyên skeletal kêmtir be. ).Ji bo çanda hucreyê, Germbûna zêde ji germbûnê pirsgirêkek cidîtir e.Ji ber vê yekê, germahiya di inkubatorê de bi gelemperî hinekî li jêr germahiya optimum tê danîn.
2.4.1 Germahiya optimum ji bo xetên hucreyên cihêreng
Piraniya xêzên şaneyên mirov û memikan ji bo mezinbûna çêtirîn di 36°C heya 37°C de têne hilanîn.
Ji bo mezinbûna herî baş xaneyên kêzikan di 27°C de têne çandin;di germahiyên kêmtir û germahiyên di navbera 27°C û 30°C de hêdî hêdî mezin dibin.Li ser 30°C, zindîbûna şaneyên kêzikan kêm dibe, heke ew vegere 27°C jî, şaneyên wê baş nabin.
Rêzên xaneyên balindeyan ji bo ku bigihîjin mezinbûna herî zêde pêdivî bi 38,5 °C heye.Her çend van şaneyan di 37°C de bihêlin jî, ew ê hêdîtir mezin bibin.
Rêzikên şaneyên ku ji ajalên xwînsar (wek amfîbî, masiyên ava sar) têne çêkirin, dikarin germahiyek berfireh ji 15 °C heta 26 °C tehemûl bikin.
Dema şandinê: Feb-01-2023